有一个带有氨苄青霉素和四环素抗性的质粒,在其四环素抗性基因内有一个该质粒唯一的EcoRI酶切位点,今欲用 EcoRI位点克隆果蝇DNA,构建一个基因库,连接的产物转化大肠杆菌菌株DH5a ,试问:
a) 在培养基中加入哪一种抗生素用于选择阳性克隆?
b) 对哪一种抗生素有抗性的质粒携带外源果蝇DNA片段?
c) 如果有的克隆可抗两种抗生素,如何解释?
在下列六种限制性酶图谱中,有一种排列方式与凝胶电泳的带型是一致的。三种酶分别是:E-EcoRI、N-NcoI、A-AatII。
试回答:
a) 根据电泳中DNA带型,选择正确的图谱并说明原因。
b) 在将这块凝胶转移后进行Southern杂交分析,带星点的是与pep基因杂交的信号带,说明pep在图谱中的位置。